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什么是miRNA?
miRNA是真核生物中广泛存在的一种长约21到23个核苷酸的RNA分子,可调节其他基因的表达。miRNA来自一些从DNA转录而来,但无法进一步转译成蛋白质的RNA(属于非编码RNA)。miRNA通过与靶信使核糖核酸(mRNA)特异结合,从而抑制转录后基因表达, 在调控基因表达、细胞周期、生物体发育时序等方面起重要作用。在动物中,一个微RNA通常可以调控数十个基因
什么是siRNA?
siRNA是与靶基因互补的一种长约21-23个碱基对的双链 RNA,1999年第一次发现是英国科学家Hamilton在植物中发现的,2001年,Elbashir 等科学家已成功合成siRNA,并发现将其转入HELA细胞后能够引发特异性沉默。经过研究发现,siRNA 是一种降解 mRNA 的后转录基因沉默(PTGS),通过特异性诱导靶mRNA 降解从而导致细胞基因靶向性沉默的现象。
miRNA的作用机制
miRNA对靶基因的作用机制一直是众多研究人员的关注热点。最早被发现的两个
miRNA ——lin4和let-7被认为是通过不完全互补结合到基因mRNA 3' UTR,以一种未知的方式抑制蛋白质翻译,进而抑制蛋白质合成,阻断mRNA的翻译过程。后来的研究也发现,多个果蝇 miRNA和它们的基因mRNA的 3' UTR 存在部分同源。但由于 miRNA与其目标靶之间的互补是不完全的,用生物信息学的方法鉴定 miRNA的目标位点并非易事。在植物中,由于 miRNA与潜在的基因是完全互补的,使得植物的miRNA预测相对较容易。但这些预测基因是否就是 miRNA的靶基因,还需要作进一步验证。研究表明, miRNA基因是一类高度保守的基因家族,按其与基因的作用模式不同,主要可分为以下3种类型:
①作用时与靶标基因完全互补结合,作用方式和功能与 siRNA非常类似,最后切割mRNA,常见于植物。
②作用时与靶标基因不完全互补结合,进而阻止翻译而不影响mRNA的稳定性,这是目前发现最多的作用模式,常见于动物。
③具有以上两种作用模式,当与标基因完全互补结合时,直接向切割mRNA,当与标基因不完全互补结合时,阻止基因翻译
miRNA和siRNA的相同点:
1.二者的长度都约在22nt左右。
2.二者都依赖Dicer酶的加工,是Dicer的产物,所以具有Dicer产物的特点。
3.二者生成都需要Argonaute家族蛋白存在。
4.二者都是RISC组分,所以其功能界限变得不清晰,如二者在介导沉默机制上有重叠。
5.miRNA和siRNA合成都是由双链的RNA或RNA前体形成的
miRNA和siRNA的不同点:
1.根本区别是miRNA是内源的,是生物体的固有因素;而siRNA是人工体外合成的,通过转染进入人体内,是RNA干涉的中间产物。
2.结构上,miRNA是单链RNA,而siRNA是双链RNA。
3.Dicer酶对二者的加工过程不同,miRNA是不对称加工,miRNA仅是剪切pre-miRNA的一个侧臂,其他部分降解;而siRNA对称地来源于双链RNA的前体的两侧臂。
4.在作用位置上,miRNA主要作用于靶标基因3′-UTR区,而siRNA可作用于mRNA的任何部位。
5.在作用方式上,miRNA可抑制靶标基因的翻译,也可以导致靶标基因降解,即在转录水平后和翻译水平起作用,而siRNA只能导致靶标基因的降解,即为转录水平后调控。
6.miRNA主要在发育过程中起作用,调节内源基因表达,而siRNA不参与生物生长,是RNAi的产物,原始作用是抑制转座子活性和病毒感染。
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