线粒体自噬研究工具

1、 Pink/Parkin pathway         

2、 Bnip3/Nix pathway  

3、 FUNDC1 pathway   

Mitophagy pathway: Pink1/Parkin OR Bnip3/Nix   

线粒体自噬的异常和很多疾病密切相关, 因此对于线粒体自噬的具体分子机制以及生理意义研究有很重要的生物学意义。汉恒生物经验丰富的线粒体自噬研究团队，为您提供线粒体自噬研究方案与研究工具。

汉恒线粒体自噬表型研究工具

1）Ad-GFP-LC3腺病毒系统，可高效感染目的细胞，表达GFP-LC3，感染后细胞可在荧光显微镜下实时观察自噬的整体水平；

2）Ad-Mito-dsred腺病毒系统，为汉恒生物自主研发的线粒体特异性定位荧光探针（HBAD-Mito-dsred）可准确定位标记线粒体，结合汉恒独家推出的绿色单标LC3细胞自噬腺病毒的使用，即可准确实时地追踪线粒体自噬的动态过程；

使用方法：Ad-GFP-LC3+HBAD-Mito-dsred共感染目的细胞，confocal检测双荧光共定位的情况，如果共定位，则存在线粒体自噬！

PMID: 32194851

3）mKeima病毒工具：mKeima所表达的Keima蛋白定位于线粒体基质，当线粒体自噬体与酸性溶酶体融合后，递送到溶酶体的Keima量可以通过在550nm处激发对应的620nm采集的图像荧光强度/440nm处激发对应的620nm采集的图像荧光强度的比值来估计，从而反映细胞内线粒体的自噬情况。

注：Keima来源于珊瑚虫，具有PH值依赖性的双峰激发光谱，在中性和酸性环境中分别于440nm和550nm处被激发，发射峰则为620nm的红光，为方便观察统计，一般人为将440nm处激发出的光的颜色调成绿色（如操作有难度，可咨询仪器工程师）。

PMID: 33042281

4）Cox8-EGFP-mCherry病毒工具：将线粒体内膜蛋白Cox8的前导肽序列与EGFP-mCherry荧光串联序列融合表达，在细胞质中，红色荧光蛋白和绿色荧光蛋白同时表达，表现为黄色；若发生线粒体自噬，由于溶酶体偏酸性的环境，在自噬溶酶体中，绿色荧光蛋白淬灭，只剩下红色荧光信号。因此可以通过统计红色荧光斑点数来衡量线粒体自噬水平。

PMID:34739325

汉恒线粒体自噬通路研究工具

1）Ad-Parkin-EGFP

2）Ad-Bnip3-EGFP

3）Ad-Nix-EGFP

4）Ad-FUNDC1-EGFP

使用方法：与汉恒HBAD-Mito-dsred定位线粒体共感染目的细胞，confocal检测共定位情况，鉴别相关信号分子的线粒体转位！

除此之外，我们还拥有参与自噬的常见基因的腺病毒现货Beclin1、Atg7等满足您实验的需求。

PMID: 19966284（此图Parkin为YFP标记，仅供参考）