病毒工具
- 慢病毒
  - 慢病毒包装
  - 稳定细胞株构建
  - T细胞专用慢病毒
  - 慢病毒客户案例
- 腺相关病毒
  - 腺相关病毒(AAV)包装
  - 特异性腺相关病毒
  - 光遗传/化学遗传工具
  - 腺相关病毒(AAV)客户案例
- 腺病毒
  - 腺病毒包装
  - 悬浮细胞专用腺病毒
  - 荧光探针工具腺病毒
  - 腺病毒客户案例
- 更多病毒服务
  - 病毒选择指南 & FAQ
  - 假病毒
专题服务
- 自噬研究
  - 自噬监测工具
  - 线粒体自噬研究工具
  - 内质网自噬研究工具
  - 分子伴侣介导的自噬研究工具
  - 自噬产品合集
- CRISPR/Cas9
  - CRISPR/Cas9基因敲除服务
  - 单克隆基因敲除细胞株
- 非编码RNA
  - microRNA服务
  - LncRNA服务
  - circRNA服务
  - 非编码RNA服务一览
- 荧光素酶
  - 荧光素酶报告基因检测服务
  - miRNA和靶基因相互作用
  - 转录因子和启动子相互作用
  - 荧光素酶报告基因质粒
更多产品服务
- 表达载体构建
  - 质粒载体构建
  - 病毒载体构建
- 合成服务
  - 基因合成
  - RNA合成
汉恒试剂
- 转染试剂系列
- 抗支原体系列
- CCK-8试剂盒
- 无缝克隆试剂盒
- qPCR Premix试剂盒
- 荧光素酶检测试剂盒
- 试剂产品一览

明星产品

慢病毒包装

试用申请

干货推荐

荧光素酶干货系列三：应用篇-转录因子与启动子互作验证

质粒转染和慢病毒转染的区别?

Cre/Loxp从原理到应用及相关重组酶系统

CRISPR/Cas9系统的“百变”应用-敲入篇

慢病毒滴度检测方法

关注我们

扫码关注我们

了解更多信息

首页 > 产品服务 > 汉恒试剂

无缝克隆试剂盒

无缝克隆技术是一种新的、快速、简洁的克隆方法，可以在质粒的任何位点进行一个或多个目标DNA的片断的插入，而不需要任何限制性内切酶和连接酶。突破传统的双酶切再加上连接，只需要一步重组法，即可得到高效率克隆的重组载体，大大提高了工作效率。

汉恒生物研发的HB-infusion^TM无缝克隆试剂盒操作极其简单，仅需在载体的克隆位点进行线性化，并在插入片段 PCR 引物的 5’端引入与载体克隆位点两端完全一致的 15~25 bp 同源序列。将上述线性化的克隆载体和带有同源序列的 PCR 片段按合适比例混合，并加入 HB-infusion^TM Master mix，通过反应体系中 DNA外切酶、DNA聚合酶以及连接酶的在 50℃反应 20 min 即可快速完成定向克隆，阳性率几近 100%。

无缝克隆特点：

操作简单且快速

可以不需要任何限制性内切酶、连接酶，也不需要磷酸化、末端补平等操作；体系反应时间，仅需20min

应用广泛

可同时连接多个DNA片段，最多可达10个

精确高效

不附加任何多余序列，精确定向连接，阳性率高

无缝克隆原理：

在基因克隆的引物设计及目的DNA片段的扩增阶段，与常规PCR法是相同的。唯一的差异在于载体末端和引物末端应具有15-20个同源碱基，由此得到的PCR产物两端便分别带上了15-20个与载体序列同源性的碱基。

无缝克隆技术原理

HB-infusion^TM无缝克隆原理示意图

无缝克隆与传统克隆对比：

无缝克隆	传统克隆
只需要一次反应即可完成定向克隆，省略酶切、酶连等过程	PCR引物设计需引入载体上的酶切位点， PCR产物再经过酶切、胶回收、连接后定向克隆到目的载体上；或进行TA载体连接
对酶切位点无要求，可以把目的片段插入到任意载体的任意位点	需要查找合适的酶切位点，购买各种内切酶
连接片段之间不会引入任何其他序列	阳性率低
可以同时克隆多个片段	多个片段，通常只能分多次拼接

HB-infusion^TM产品包装：

货号	产品组成	使用次数	体积
HB-infusion-20T	2 x HB-infusion^TM Master mix	20 tests	200uL
	Positive linearized pUC vector （250 ng）	5 tsets	25uL
	Positive control insert (500 ng)	5 tsets	25uL
	储存条件	-20℃