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化学修饰的热启动DNA聚合酶,在室温时酶活力被完全抑制,避免非特异性扩增。95oC加热数分钟后抑制失效,Taq酶恢复活力。
SYBR Green I游离状态下几乎无荧光,与双链DNA非特异性结合后产生很强的荧光。反应体系中SYBR Green I的荧光强度,与双链DNA的含量成正比,因此可用于目的基因的定量。
货号 | 产品名称 | 产品规格 |
---|---|---|
HB-START-1000 | HBStart Green qPCR Premix | 1mL |
试剂 | 使用量 |
---|---|
HBStart Green qPCR Premix | 5μL |
正向引物(10μM) | 0.4μL |
反向引物(10μM) | 0.4μL |
DNA模板 | XμL |
Nuclease-Free Water | To 10μL |
注:推荐模板加样量为1~2μL,如模板类型为未稀释cDNA原液,模板添加量不应超过总反应体系的10%。不同种类DNA模板中含有的靶基因拷贝数目不同,必要时可进行梯度稀释,以确定最佳的DNA模板添加量。
2、PCR程序
高扩增效率选择三步法;高特异性选择两步法。
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