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慢病毒包装

Lentivirus Packaging
慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。
慢病毒特点
感染范围广
慢病毒可有效感染分裂和非分裂细胞,适合几乎所有细胞系,如神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等。
可稳定表达
慢病毒可将外源基因整合到宿主细胞基因组上,不随着细胞的分裂传代而丢失,可实现目的基因的长时间稳定表达。
操作安全性高
慢病毒采用的是自失活复制缺陷型病毒株,保障操作安全。
慢病毒产品与服务
服务类型 提供产品 滴度 适用范围
常规基因过表达/干扰慢病毒
miRNA sponge/antago慢病毒
circRNA /LncRNA过表达和干扰慢病毒
CRISPR/Cas9慢病毒定制
慢病毒现货
常规滴度慢病毒 108TU/ml 适用于普通细胞系感染
高滴度慢病毒 109TU/ml 适用于难转染细胞系,如悬浮细胞;或用于动物活体水平感染

服务流程
慢病毒包装服务流程



质量标准
检测项目 检测方法 检测结果
支原体 PCR 阴性
内毒素 LAL 合格
细菌 培养法 阴性
真菌 培养法 阴性
活性滴度 感染法 ≥10^8 TU/ml
载体选择(常用)
编号 调控方式 元件顺序 原核抗性 真核抗性 荧光标记 启动子
LV005 过表达 pHBLV-CMV-MCS-EF1-mCherry-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin mCherry CMV
LV006 过表达 pHBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-mCherry-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin mCherry CMV
LV007 过表达 pHBLV-CMV-MCS-EF1-Puromycin Ampicillin Puromycin CMV
LV008 过表达 pHBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-Puromycin Ampicillin Puromycin CMV
LV011 过表达 pHBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-ZsGreen-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin ZsGreen CMV
LV012 过表达 pHBLV-CMV-MCS-EF1-ZsGreen-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin ZsGreen CMV
LV052 过表达 pHBLV-CMV-MCS-EF1-ZsGreen Ampicillin ZsGreen CMV
LV05 过表达 pHBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-ZsGreen Ampicillin ZsGreen CMV
LV081 过表达 pHBLV-EF1-MCS-CMV-Puromycin Ampicillin Puromycin EF1
LV082 过表达 pHBLV-EF1-MCS-CMV-ZsGreen Ampicillin ZsGreen EF1
LV083 过表达 pHBLV-EF1-MCS-CMV-ZsGreen-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin ZsGreen EF1
LV121 过表达 pHBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-Luc-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin Luciferase CMV
LV122 过表达 pHBLV-CMV-MCS-EF1-Luc-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin Luciferase CMV
LV027 过表达teton pHBLV-TetOn-SV40-Puromycin-TRE3GS-MCS Ampicillin Puromycin TRE3GS
LV019 干扰 pHBLV-U6-MCS-PGK-Puromycin Ampicillin Puromycin U6
LV020 干扰 pHBLV-U6-MCS-CMV-ZsGreen Ampicillin ZsGreen U6
LV021 干扰 pHBLV-U6-MCS-CMV-ZsGreen-PGK-Puromycin Ampicillin Puromycin ZsGreen U6
LV051 干扰 pHBLV-U6-MCS-EF1-mCherry-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin mCherry U6
LV124 干扰 pHBLV-U6-MCS-EF1-Luc-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin Luciferase U6
LV144 干扰 PHBLV-U6-MCS-CMV-mCherry Ampicillin mCherry U6
LV050 cas9/gRNA pHBLV-U6-gRNA-EF1-CAS9-Puromycin Ampicillin Puromycin U6
LV055 cas9/gRNA pHBLV-U6-gRNA-EF1-ZsGreen Ampicillin ZsGreen U6
LV133 cas9/gRNA pHBLV-U6-gRNA-EF1-ZsGreen-Luc Ampicillin Luciferase U6
常见问题
质粒载体和慢病毒载体的区别?如何选择?

质粒(Plasmid)是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子;慢病毒载体,指以人类免疫缺陷病毒-1 (H IV-1) 来源的一种病毒基因治疗载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。它们进入细胞的方式不一样,一般来说质粒在转染试剂的辅助下转染进入细胞,慢病毒则是直接感染细胞。

在选择质粒还是慢病毒,需要考虑实验周期、实验预算、目的基因片段大小、是否需要稳定转染等因素。

质粒相对于慢病毒,成本较低,实验周期较短,载体容量大;但转染效率通常远不及病毒感染效率,并且质粒整合基因组概率极低,如需构建稳定细胞株,选择慢病毒更为合适。

详细可参考:基因调控工具选择指南>>

慢病毒载体和腺病毒载体,该怎么选?

主要根据实验目的不同来选择,可以参考以下几个方面来判断:

1) 插入目的序列的大小:慢病毒载体包装容量一体建议在3k以内,超过可能会影响病毒滴度;腺病毒包装容量可达8k;若目的序列大小超过载体容量,滴度则会随着目的序列大小增加而降低;

2) 是否需要构建稳转细胞株:慢病毒载体可以将外源基因随机整合到目的细胞基因组中并稳定遗传,即可用于构建稳转细胞株,当然做瞬时转染也可以;而腺病毒不整合基因组,只适用于瞬时转染;

3) 目的细胞类型:像神经细胞、一些原代细胞等感染难度比较大的细胞,且后续无需建立稳转株,推荐使用腺病毒,其感染效率要远高于慢病毒。

 详细可参考:基因调控工具选择指南>>

汉恒生物的慢病毒包装系统是什么?

汉恒生物的慢病毒包装系统以三质粒系统为主,组成为psPAX2, pMD2.G, pHBLV系列质粒。

如需其他包装系统,可咨询客服。

慢病毒现货和其他慢病毒包装服务的区别?

汉恒生物的慢病毒现货产品是指已构建好的慢病毒产品,省去了基因合成,慢病毒质粒构建等步骤。

相对于其他慢病毒产品,慢病毒现货到货周期更快。

您可以在小恒基因商城输入您的基因名、基因ID或是NM号进行查询。

慢病毒感染实例


客户发表文献节选
Ferroptotic stress facilitates smooth muscle cell dedifferentiation in arterial remodelling by disrupting mitochondrial homeostasis
(杂志: Cell Death & Differentiation,IF= 12.4 ,海军军医大学)
Downregulation of MUS81 expression inhibits cell migration and maintains EBV latent
(杂志: Journal of Medical Virology,IF= 12.7 ,青岛大学)
LITTIP/Lgr6/HnRNPK complex regulates cementogenesis via Wnt signaling
(杂志: International Journal of Oral Science,IF= 14.9,四川大学华西口腔医院)
CD8 T Cell-Derived Exosomal miR-186-5p Elicits Renal Inflammation via Activating Tubular TLR7/8 Signal Axis
(杂志: Advanced Science,IF= 15.1 ,南京大学)
TRPC channels blockade abolishes endotoxemic cardiac dysfunction by hampering intracellular inflammation and Ca2+ leakage
(杂志: Nature communications,IF= 16.6 ,第四军医大学)
NDFIP1 limits cellular TAZ accumulation via exosomal sorting to inhibit NSCLC proliferation
(杂志: Protein & Cell,IF= 21.1,上海交通大学)
KIAA1429 promotes tumorigenesis and gefitinib resistance in lung adenocarcinoma by activating the
(杂志: Drug Resistance Updates,IF= 24.3 ,南方医科大学)
HDAC1/2/3 are major histone desuccinylases critical for promoter desuccinylation
(杂志: Cell Discovery,IF= 33.5,华东师范大学芜湖医院)
A novel polypeptide encoded by the circular RNA ZKSCAN1 suppresses HCC via degradation of mTOR
(杂志:Molecular Cancer,IF=37.3,中国农业大学)
The cGAS-STING pathway-dependent sensing of mitochondrial DNA mediates ocular surface inflammation
(杂志: Signal Transduction and Targeted Therapy,IF=39.3,厦门大学附属厦门眼科中心)
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