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首页 > 产品服务 > 腺病毒

腺病毒包装

Adenovirus Packaging

重组腺病毒（AdV）是一种复制缺陷的腺病毒载体系统，在基因治疗、基础生命科学研究等领域被广泛应用。目前常用的腺病毒载体基于人腺病毒5型（Ad5），其基因组是36 kb长的线性双链DNA。腺病毒可通过自身的纤维（fiber）和细胞表面的受体结合被内吞进入细胞，然后从内吞体（endosome）转移到细胞质和细胞核内，借助细胞的转录和翻译机器启动病毒的复制组装。一个完整的病毒生活周期会引发细胞死亡从而释放出病毒粒子。

腺病毒特点

感染范围广

腺病毒可适用于普通细胞系的感染，也可用于悬浮细胞、原代细胞等。

感染效率高

腺病毒的滴度可高达10¹¹PFU/ml，感染效率高，可感染悬浮细胞、原代细胞等。

载体容量大

腺病毒的载体容量较大，最高可达8kb。

产品与服务
服务流程
质量标准
载体选择
客户评价
常见问题
感染实例
发表文献

腺病毒产品与服务

服务类型	提供产品	滴度	适用范围
常规基因过表达/干扰腺病毒 miRNA sponge/antago腺病毒 circRNA/LncRNA过表达和干扰腺病毒 CRISPR/Cas9腺病毒定制腺病毒纯化服务腺病毒现货产品	普通腺病毒	10¹⁰PFU/ml或10¹¹PFU/ml	适用于普通细胞系感染
		悬浮细胞专用腺病毒Ads	10¹⁰PFU/ml或10¹¹PFU/ml	专为悬浮细胞特殊设计，兼容普通细胞和原代细胞，效率更高

服务流程

质量标准

检测项目	检测方法	检测结果
支原体	PCR	阴性
内毒素	LAL	合格
细菌	培养法	阴性
真菌	培养法	阴性
活性滴度	感染法	≥10^10 PFU/ml

载体选择（常用）

编号	调控方式	元件顺序	原核抗性	真核抗性	荧光标记	启动子
Adeasy014	过表达	pAdEasy-EF1-MCS-CMV-EGFP	Kanamycin	无	EGFP	EF1
Adeasy015	过表达	pAdEasy-EF1-MCS-CMV-mCherry	Kanamycin	无	mCherry	EF1
Adeasy018	过表达	pAdEasy-CMV	Kanamycin	无	无	CMV
Adeasy022	过表达	pAdEasy-CMV-3flag	Kanamycin	无	无	CMV
Adeasy023	过表达	pAdEasy-EF1-MCS-3flag-CMV-EGFP	Kanamycin	无	EGFP	EF1
Adeasy024	过表达	pAdEasy-EF1-MCS-CMV-LUC	Kanamycin	无	Luciferase	EF1
Adeasy027	过表达	pAdEasy-EF1-MCS-CMV-eRFP	Kanamycin	无	eRFP	EF1
Adeasy030	过表达	pAdEasy-EF1-MCS-3flag-CMV-mCherry	Kanamycin	无	mCherry	EF1
Adeasy032	过表达	pAdeasy-EF1-CircRNA-CMV-EGFP	Kanamycin	无	EGFP	EF1
Adeasy019	干扰	pAdEasy-U6	Kanamycin	无	无	U6
Adeasy020	干扰	pAdEasy-U6-CMV-EGFP	Kanamycin	无	EGFP	U6
Adeasy021	干扰	pAdEasy-U6-CMV-mCherry	Kanamycin	无	mCherry	U6
Adeasy028	干扰	pAdEasy-U6-CMV-eRFP	Kanamycin	无	eRFP	U6
Adeasy026	Cas9/gRNA	pAdEasy-U6-CMV-Cas9-2A-eRFP	Kanamycin	无	eRFP	U6
Adeasy043	Cas9/gRNA	pAdEasy-U6-scaffold-CMV-Cas9-T2A-ZsGreen	Kanamycin	无	ZsGreen	U6

更多载体类型，请点击咨询在线技术客服>>

客户评价

南京医科大学赵同学

因为目的基因比较大，所有困扰了很久，在实验室学姐的推荐下尝试了汉恒的腺病毒，果然没有让我失望，我的大基因也成功感染了，而且效果很不错！

腺病毒感染Pan02，MOI=100

厦门大学林同学

和汉恒的合作真的很愉快，从售前到售后都能感觉到工作人员的专业和负责，解答了我很多的疑惑，回复消息也很快，高效沟通真的很节约时间成本。

腺病毒感染CHO，MOI=30

上海交通大学医学院附属仁济医院孙同学

一开始自己构建质粒做过表达，但是都失败了，最后还是找汉恒做了腺病毒，没想到效果这么好！也帮我解答了很多的困难，最后成功检测过表达。真是帮了大忙了！

腺病毒感染H9C2，MOI=70

常见问题

感染细胞，腺病毒和慢病毒该怎么选择？

主要根据实验目的不同来选择，可以参考以下几个方面来判断：

（1）插入目的序列的大小：慢病毒载体包装容量一体建议在3k以内，超过可能会影响病毒滴度；腺病毒包装容量可达8k；若目的序列大小超过载体容量，滴度则会随着目的序列大小增加而降低；

（2）是否需要构建稳转细胞株：慢病毒载体可以将外源基因随机整合到目的细胞基因组中并稳定遗传，即可用于构建稳转细胞株，当然做瞬时转染也可以；而腺病毒不整合基因组，只适用于瞬时转染；

（3）目的细胞类型：像神经细胞、一些原代细胞等感染难度比较大的细胞，且后续无需建立稳转株，推荐使用腺病毒，其感染效率要远高于慢病毒。

详细可参考：基因调控工具选择指南>>

腺病毒包装系统AdMax和Adeasy的区别？

腺病毒载体的包装系统主要有两种：AdMax系统和Adeasy系统。这两种包装系统都是二质粒系统，即需要一个骨架质粒和一个携带外源基因的穿梭质粒；都需要能够表达E1基因的293A细胞作为包装细胞，另外293A细胞为单层细胞有利于空斑的形成和观察。AdMax和Adeasy的主要区别在于病毒基因组重组的过程不同：

AdMax系统：病毒基因组重组过程简单，骨架质粒和穿梭质粒直接转染至293A细胞中重组即可。

Adeasy系统：该系统是在细菌中进行的。首先骨架质粒整合到BJ5183感受态细胞中，再将穿梭质粒线性化后转化到BJ5183，二者则在BJ5193中重组，验证重组效果后，转至Stbl3感受态细胞大量制备重组质粒，再线性化后，即可转入包装细胞进行包毒。

腺病毒可以感染动物吗？

纯化的腺病毒滴度可达滴度可达到10¹¹PFU/ml，可以用于动物实验。

腺病毒是否需要纯化，纯化方式是什么？

未纯化的病毒液中含有缺损病毒颗粒、细胞碎片、培养基等杂质，当被注入动物体内，会引免疫反应，所以在需要做动物实验时，通常需要对腺病毒进行纯化。而进行细胞实验，可使用未纯化的腺病毒。

详情可以参考干货文章《动物实验用腺病毒是否有必要纯化？》

汉恒生物推荐采用PEG8000沉淀-CsCl密度梯度离心-透析联用法进行腺病毒纯化。

腺病毒感染实例

腺病毒感染贴壁细胞

腺病毒转染

自噬腺病毒转染

mRFP-GFP-LC3自噬双标腺病毒感染HCT116和HT29，汉恒客户2017年发表于CELL，IF＞30

腺病毒感染原代细胞

腺病毒用于动物实验

腺病毒纯化的滴度可达到10¹¹PFU/ml，用于动物实验。

腺病毒用于动物实验

小鼠眼部结膜下注射纯化腺病毒Ad-SIRT1和对照AdGFP：PFU=10¹¹/ml，3 μl/single eye；48hr后观察GFP表达。

客户发表文献节选

Fusobacterium nucleatum Promotes Chemoresistance to Colorectal Cancer by Modulating Autophagy

（杂志:CELL，IF=41.582，上海交通大学附属仁济医院）

Local hyperthermia therapy induces browning of white fat and treats obesity

（杂志:CELL，IF=41.582，华东师范大学）

TRIB3 Promotes APL Progression through Stabilization of the Oncoprotein PML-RARa and Inhibition of p53-Mediated Senescence

（杂志:Cancer Cell，IF=31.743，中国医学科学院）

An ALOX12–12-HETE–GPR31 signaling axis is a key mediator of hepatic ischemia–reperfusion injury

（杂志:NATURE MEDICINE，IF=30.641，武汉大学）

WWC proteins mediate LATS1/2 activation by Hippo kinases and imply a tumor suppression strategy

（杂志:MOLECULAR CELL，IF=17.970，复旦大学儿童医院）

E3 ubiquitin ligase RNF5 protects against hepatic ischemia reperfusion injury by mediating PGAM5 ubiquitination

（杂志:HEPATOLOGY，IF=17.425，郑州大学第一附属医院）

SIRT3 Acts As a Negative Regulator of Autophagy Dictating Hepatocyte Susceptibility to Lipotoxicity

（杂志:HEPATOLOGY，IF=17.425，浙江大学）

atg7-Based Autophagy Activation Reverses Doxorubicin-Induced Cardiotoxicity

（杂志:Circulation Research，IF=17.367，北京中医药大学）

Protective effect of HINT2 on mitochondrial function via repressing MCU complex activation attenuates cardiac microvascular ischemia–reperfusion injury

（杂志:Basic Research in Cardiology，IF=17.165，复旦大学附属中山医院）

AKAP1 Deficiency Attenuates Diet-Induced Obesity and Insulin Resistance by Promoting Fatty Acid Oxidation and Thermogenesis in Brown Adipocytes

（杂志:Advanced Science，IF=16.806，空军军医大学）