进行一个基因的过表达，添加 flag 标签的目的是什么呢？

2022-08-05   # 1

蛋白标签（protein tag）是指利用 DNA 体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白质，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。比较常用的Flag标签，一般用3FLAG（分子量 2.64kd，一个氨基酸的平均分子量是 0.110KDa）的比较多，主要是方便在 WB 检测表达情况时可以用 Flag抗体去检测外源蛋白过表达的情况，也可以方便的用于蛋白免疫沉淀实验（Immunoprecipitation, IP）。

2022-08-05   # 2

对于带3FLAG标签的蛋白用 Flag 抗体进行蛋白免疫印迹（western blot，WB）检测时，结果会是一条外源表达的条带；如果用目的抗体去检测，结果可能会是两个条带（内源蛋白+外源过表达蛋白），外源过表达条带在内源条带的上方，但是很多时候两条带会在一起形成一条比较粗的条带。