干扰实验
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落落
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2023-05-08 •
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做干扰实验检测到目的基因的mRNA水平明显降低,但蛋白水平却没有检测到明显的变化,为什么会出现这种情况?
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最后更新于 2023-05-08
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做干扰实验检测到目的基因的mRNA水平明显降低,但蛋白水平却没有检测到明显的变化,为什么会出现这种情况?
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RNAi 是针对转录水平的调控,到蛋白多一步翻译,某些情况下不能保证完全与蛋白水平一致:
1)该蛋白的半衰期比较长,这个需要用测定半衰期的方法检测,具体是用一些蛋白合成抑制剂处理后,隔一定时间检测该蛋白的水平;
2)该蛋白有多种转录本,可能有不同 isoform 的蛋白,要确定下是不是 siRNA是针对所有的转录本;
3)另外最后的可能就是该基因的翻译效率较高,较少 mRNA 仍能维持较高的蛋白水平。