慢病毒(lentivirus,LV)感染效率低

By 11111_ at 2023-08-15 • 0 人收藏 • 620 人看过

CCRF-CEM用慢病毒(lentivirus,LV)感染效率低,看不到荧光怎么办?

1 个回复 | 最后更新于 2023-08-15
2023-08-15   # 1

CCRF-CEM是悬浮细胞,悬浮细胞比较难感染,可以进行以下尝试:
1.添加适量的助转剂;
2.按照说明书进行小体积感染法;
3.延长感染时间,每隔一段时间晃动培养板混匀一次;
4.转染后放入离心机,室温低速(900-1500g)离心1h,再放入CO2培养箱继续感染;
5.可以进行重复感染,即第一次感染24-48h后再重新进行病毒感染,这样可以增加病毒感染细胞的机率;
6.延长表达检测时间,感染悬浮细胞,荧光观察时间会延长到72h或96h,并且荧光比较弱,需要耐心仔细观察。

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