消化细胞所用的胰蛋白酶怎么选择？其成分中的EDTA有什么作用？

贴壁不牢和半贴壁细胞尽量使用浓度0.05%不含EDTA的胰酶，这样易于控制，对细胞的伤害也降到最低。对于难消化的细胞更适合选择含EDTA的0.25%的胰酶。

EDTA是钙离子的鳌合剂，胰酶切割ECM负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca2+，抑制整合素的贴壁活性，所以EDTA的作用更加温和在胰酶中加入EDTA的作用简单的说就是为了增加胰酶的消化作用，尤其适用于比较难于消化的细胞可以减少胰消化时间，以减少酶对细胞的损伤作用，含EDTA的酶作用后，必须离心才能去除EDTA。

根据实验需求许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用胰酶/EDTA联合作用。例如在做细胞凋亡检测时，细胞不能用含有EDTA的胰酶消化，Annexin V（膜联蛋白）是Ca2+依赖的蛋白，EDTA会螯合Ca2+从而影响Annexin V，进而影响结果，因此需选用不含EDTA的胰酶。