miRNA sponge做miRNA干扰有哪些优势?
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小脑斧123
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2023-11-22 •
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最后更新于 2023-11-22
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miRNA sponge可以吸附众多miRNA的分子,典型结构是包含4到10个miRNA结合位点,每个结合位点在中间位置包含错配,以避免受到 Ago2 介导的核酸内切酶的影响。完全互补的海绵也可以起到抑制活性,但其本身容易被降解,因为完全互补的miRNA就等于是siRNA效果。
1. 解决了miRNA的反义序列含有连续4个T而无法设计的问题,连续的T会导致三型启动子U6、H1无法完成转录,从而难以构建干扰序列,sponges则对启动子的选择无任何偏向性;
2. 依靠CMV等二型启动子驱动表达,比如特异性启动子、诱导表达系统;
3. 可以串联多个miRNA的反义序列,同时敲减不同的miRNA;
4. 抑制效果长,sponges含有polyA尾,提高稳定性;错配形式的sponges可以使吸附miRNA后,核酸内切酶无法对其进行切割得以保留。因此sponges存在时间更长,抑制更加稳定。