为什么要做TA克隆(TA cloning)?为什么不能把目的基因直接连到表达载体上,然后测序,为什么一定要先连到TA克隆上然后测序在酶切连到表达载体上呢?
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小脑斧123
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2024-02-29 •
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最后更新于 2024-02-29
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因为TA克隆简单成功率高,大多数的Taq酶都会在PCR产物的末端加一个碱基A,而T载体的缺口有一个凸出的T,正好可以配对,省去了对克隆载体和PCR产物的酶切,而且T载体连接的效率高,操作简单,可进行测序后对正确克隆扩大培养,切下目的片段,用于后续实验,这样得到的目的片段量大而且序列单一准确。