用自噬双标病毒感染细胞观察自噬时,最终的结果应该怎么统计,是统计绿光和红光的细胞个数吗?
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梧桐树下
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2024-05-11 •
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最后更新于 2024-05-11
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不是的。建议使用激光共聚焦显微镜来观察,将绿光和红光的细胞图像merge后,统计单个细胞内的红色荧光点数和黄色荧光点数,然后计算它们的比值即可反映自噬流的情况。EGFP是酸性敏感的荧光蛋白,在溶酶体的酸性环境中会淬灭,因此红色荧光代表自噬溶酶体,黄色荧光代表自噬小体。另外,有些文章统计的是绿色荧光点和红色荧光点的变化,这样也能反映自噬的变化,但由于自噬小体和自噬溶酶体都能显示红光,因此不能具体分辨出自噬流的变化。