qPCR的Ct值偏大,考虑是哪些因素引起的呢?
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云梦
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2024-08-30 •
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最后更新于 2024-08-30
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1)模板量低或基因表达丰度低,可以增加模板量观察Ct值是否成相应倍数减少;2)qPCR整个反应条件不适宜或引物设计不当导致扩增效率低,可以通过标准曲线确认扩增效率;3)扩增产物过长,可以考虑用三步法程序扩增或优化引物,扩增产物长度不超过300 bp;4)体系中可能存在抑制剂影响酶的活性,可以考虑梯度稀释模板或重新制备纯度更高的模板。