我在构建载体,PCR扩增目的片段的时候,总是有突变,有什么解决办法吗?
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1、选择高保真酶进行扩增,可以有效避免扩增过程中碱基的突变。
2、核对引物序列,避免因为引物序列错误而引入突变。
3、循环数越高出现突变的几率越高,扩增循环数不要太高,一般不超过30个扩增循环。